Nuôi cấy tế bào thành công phụ thuộc rất nhiều vào việc giữ cho các tế bào không bị ngoại nhiễm bởi các vi sinh vật như vi khuẩn, nấm và vi-rút. Các loại vật chứa, môi trường và hóa chất không tiệt trùng,các hạt trong không khí chứa vi sinh vật, tủ ấm không sạch và bề mặt thao tác dính bẩn là tất cả các nguồn gây ngoại nhiễm. Kỹ thuật vô trùng, được thiết kế để tạo ra một rào cản giữa các vi sinh vật trong môi trường và môi trường nuôi cấy tế bào vô trùng. Các yếu tố cốt lõi của kỹ thuật vô trùng là một khu vực làm việc vô trùng, vệ sinh cá nhân tốt, thuốc thử và môi trường nuôi cấy vô trùng, và thao tác vô trùng.

Kỹ thuật vô trùng bao gồm những yếu tố nào?

Các yếu tố cốt lõi của kỹ thuật vô trùng là một khu vực làm việc vô trùng, vệ sinh cá nhân tốt, thuốc thử và môi trường nuôi cấy vô trùng, và thao tác vô trùng.

Khu vực làm việc vô trùng

Cách đơn giản và tiết kiệm nhất để giảm ngoại nhiễm từ các hạt trong không khí và khí dung aerosol (ví dụ: bụi, bào tử, da bong, hắt hơi) là sử dụng tủ thao tác khi nuôi cấy tế bào.

• Tủ thao tác nuôi cấy tế bào phải được thiết lập đúng cách và được đặt ở khu vực giới hạn cho nuôi cấy tế bào, không tiếp xúc trực tiếp với luồng khí từ cửa ra vào, cửa sổ và các thiết bị khác.
• Bề mặt làm việc không được lộn xộn và chỉ chứa các đồ dùng cần thiết cho một quy trình làm việc cụ thể; không nên sử dụng tủ thao tác như là một khu vực lưu trữ.
• Để đảm bảo kỹ thuật vô trùng, trước và sau khi thực hiện quy trình nuôi cấy, bề mặt làm việc cần được khử trùng triệt để; các khu vực và thiết bị xung quanh nên được vệ sinh thường xuyên.
• Để vệ sinh, lau bề mặt làm việc bằng ethanol 70% trước và trong khi làm việc,
  đặc biệt là sau bất kỳ sự cố đổ dung dịch ra bề mặt làm việc.
• Không sử dụng đèn đốt Bunsen không quy trình nuôi cấy tế bào
• Để tủ thao tác nuôi cấy tế bào luôn luôn chạy, chỉ tắt khi tủ không được sử dụng trong thời gian dài.

Đảm bảo kỹ thuật vô trùng bằng cách đảm bảo vệ sinh cá nhân

Rửa tay trước và sau khi làm việc trong quy trình nuôi cấy tế bào. Ngoài việc bảo vệ bạn trước vật liệu nguy hiểm, việc mặc đồ bảo hộ cá nhân còn giúp đảm bảo kỹ thuật vô trùng vì nó giúp làm giảm nguy cơ gây ngoại nhiễm từ da bị bong ra cũng như bụi bẩn từ quần áo của bạn.

Môi trường nuôi cấy và hóa chất vô trùng

Hóa chất và môi trường nuôi cấy thương mại thường đã trải qua quá trình kiểm soát chất lượng nghiêm ngặt để đảm bảo tính vô trùng của chúng, nhưng vẫn có thể bị ngoại nhiễm trong quá trình thao tác. Việc thực hiện theo các hướng dẫn thao tác vô trùng dưới đây để tránh làm ô nhiễm chúng. Luôn khử trùng các hóa chất, môi trường hoặc dung dịch
được chuẩn bị trong phòng thí nghiệm bằng cách sử dụng quy trình khử trùng thích hợp (ví dụ: nồi hấp, lọc vô trùng).

Những thao tác giúp đảm bảo kỹ thuật vô trùng

• Luôn lau tay và khu vực làm việc của bạn với ethanol 70%.
• Lau sạch bên ngoài các vật chứa, bình, đĩa và bát đĩa bằng ethanol 70% trước khi đặt chúng trong tủ nuôi cấy tế bào.
• Tránh đổ môi trường và hóa chất trực tiếp từ chai hoặc bình.
• Sử dụng pipet thủy tinh vô trùng hoặc pipet nhựa dùng một lần và pipetor để làm việc với chất lỏng, và chỉ sử dụng mỗi pipet một lần để tránh nhiễm chéo. Đừng tháo bao đựng pipet cho đến khi chúng được sử dụng. Giữ pipet tại khu vực làm việc của bạn.
• Luôn đậy nắp chai và bình sau khi sử dụng và dán các đĩa bằng băng hoặc cất trong bao zip để ngăn ngừa vi sinh vật và các chất gây nhiễm trong không khí.
• Không bao giờ mở bình, chai, đĩa Petri vô trùng, v.v… cho đến khi bạn sẵn sàng sử dụng nó và không bao giờ để nó luôn luôn mở trong môi trường.
• Nếu bạn tháo nắp hoặc miếng dán và phải đặt nó xuống bề mặt làm việc, hãy đặt
  nắp với mặt mở hướng xuống.
• Chỉ sử dụng dụng cụ thủy tinh và các thiết bị vô trùng khác.
• Không nói, hát hoặc huýt sáo khi bạn đang thực hiện các thao tác kỹ thuật vô trùng.
• Thực hiện các thí nghiệm của bạn càng nhanh càng tốt để giảm thiểu ngoại nhiễm.

Để dễ hình dung về các điểm then chốt trong kỹ thuật vô trùng, chúng ta hãy cùng xem video bên dưới nhé!

Nội dung bài viết được tham khảo từ ThermoFisher Scientific dịch và chỉnh sửa bởi sinhhocphantu.net. 

 9,370 total views,  3 views today